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液相色谱仪的工作原理是利用液体混合物在流动相与固定相中的分配或吸附等差异，由流动相将样品带入色谱柱中进行分离，经检测器检测并进行数据处理后，根据保留时间和峰面积(峰高)进行定性定量分析。液相色谱仪是化学分析中发展最快、应用最广的分析仪器，现已广泛应用于药品检验、产品检测、农残检测等各个方面。我们运用通用GI-3000高效液相色谱仪做过一组实验，设定流动相流速为1mL/min;选取检定规程规定的波长254nm作为检测波长。分别用标准物质及流动相作为样品进样，进样量为10～20μL。结论得出：杂峰不大可能是由杂质引起的，很可能是由所进样品在色谱管路中的不规则扩散造成的。不规则的扩散使甲醇流动相在进样后产生了局部的湍流，形成类似于移动的驻波，而这段带有驻波的流动相在经过检测器时，对通过检测池的紫外光产生了干涉作用，使通过检测池的紫外吸收信号增强。鉴于仪器在进样时引发信号波动，而这些波动对测量结果会产生干扰，因此，可以考虑把进样干扰作为液相色谱仪性能评价的一项指标，这有助于引导相关液相色谱仪的生产研发单位对仪器的结构加以改进，降低或消除此类干扰，从而提升仪器的计量性...
液相色谱仪是一款重要的精密仪器,在买际使用过程中,液相色谱仪经常发生各种故障,直接影响了其精密度,因此应特别注意液相色谱仪故障问题,采取科学、有效的处理措施,及时消除故障隐患,恢复其良好使用性能。1.高压输液系统故障：高效液相色谱仪运行过程中高压泵是其动力来源,高压泵工作不稳定,往往会造成流量相抽取量反复变化,系统压力变化较大,直接影响了高效液相色谱仪测定结果的准确性。高压泵常见故障主要有柱塞杆磨损、密封圈渗漏和泵头有气泡。
压力过高是高效液相色谱仪在使用中最常见的问题，一般都是由于流路中有堵塞造成的。此时，我们应该分段进行检查。大多数情况下压力偏高是由色谱柱引起的，为排除此原因，应先将色谱柱甩开，将色谱柱入口处管路卸开接一空烧杯，以1ml/min流速送液，此时压力应在0.5MP以下，若此时压力较大，应作进一步判断。拆掉管道过滤器（位置在排液阀上方）上方与手动进样阀的连接管路，用扳手将管道过滤片拆下，送液确认此时的压力，若压力明显下降，说明管道过滤片堵塞，放入烧杯加入异丙醇进行超声清洗即可；若压力仍然偏高，说明仍有堵塞的地方，可能位置为单向阀或吸滤头，可先将吸滤头取下，将送液管直接插入流动相中送液，观察压力变化以排除吸滤头是否堵塞，若不是，则应对入口单向阀和出口单向阀进行清洗，烧杯中倒入异丙醇，将单向阀垂直放入（若横向放置有可能将单向阀内部部件超散）进行超声清洗，若用户经常使用缓冲盐，用60-70度的热水进行超声清洗效果更佳。若用户配有梯度系统，那么连接两台送液泵的混合器也是一个容易堵塞的地方，将混合器拆开，在个头较大的六方形金属件后方有一个头较小的类似螺帽的东西，拆开后可以看到一个很小的过滤筛板，对此部件进行超声清洗即可。
保留时间不重现有两种不同的情况：即保留时间漂移和保留时间波动。前者是指保留时间仅沿单方向发生变化，而后者指保留时间无固定规律的波动。将此两种情况区分开来对找到问题的原因往往很有帮助。如，保留时间的漂移往往由柱老化引起；而柱老化不可能引起保留时间的无规律波动。事实上，保留时间漂移的多半原因是不同机理的色谱柱老化，如固定相流失（例如通过水解），色谱柱污染（由样品或流动相所致）等。
液相色谱仪可应用于生物化学、生物医学、环境化学等方面的分析研究。随着现代医学的发展，采用液相色谱法进行生物技术研究已经成为一种常规方法。鉴于此，针对应用液相色谱法进行生物技术研究时出现的常见问题进行分析，并提出合理的解决办法。随着现代医学的发展，采用液相色谱法进行生物技术研究已经成为一种常规方法。目前，在生物化学、生物医学、环境化学等实验室均配备液相色谱仪等先进大型仪器，但是在操作者使用过程中仪器往往会出现不同的问题，亟待解决。鉴于此，以下针对应用液相色谱法进行生物技术研究时出现的常见问题进行分析，并提出合理的解决办法。
1、液相氘灯主要产生190~400nm波长范围的紫外光。主要是依靠等离子体放电（就是指始终让氘灯处于一个稳定的氘元素（D2或者重氢）电弧状态下。低于190nm波长的紫外光难以被使用的原因是其波长段被氘灯外部的石英套所吸收。2、氘灯的开关次数与其正常使用时间成反比。建议：最好在需要关灯4小时以上才关灯。以每日工作8小时来说，如果在期间不关灯的话，那你的氘灯寿命会下降三成。
随着科学技术的发展，液相色谱仪在化学分析工作中扮演了越来越重要的角色。液相色谱仪主要由贮液瓶、输液泵、进样器、色谱柱(包括柱温箱)、检测器和数据记录及处理装置组成。液相色谱仪的进样器可分为自动进样器和手动进样器两大类型。目前，手动进样器绝大多数都采用六通阀(见图1)。六通阀的优点是进样量可变范围大，进样量也较大，分析和制备通用；进样量由固定体积的定量管或微量注射器控制，重复性好，可达0．5％；耐高压，可直接在高压下把样品送入色谱柱，不需停流；如果装上电动或气动的驱动装置，可做到自动化进样。
1、进样器：平时应该注意使用二次蒸馏水和甲醇在装载状态及进样分析状态清洗；如果出现漏液现象，原因极可能为转子密封垫磨损或污染，一般要申请维修或更换配件。2、排液阀：此处不能完全密封或漏液时一般是其中的垫片污染或磨损，可卸下后取出其垫片用异丙醇超声波清洗或更换垫圈。3、单向阀：如遇到泵压不稳或流动相不能抽取，则可能是单向阀出现问题，卸下用异丙醇超声波清洗，清洗时须按其安装的方向放置在小烧杯中，切记不可与安装方向倒置超洗！4、工作站：出现死机可重起计算机；不正常运行时，首先可更换电脑测试其硬件故障；或在本机上重新插拔接口、重新安装软件。5、过滤器：（GI通用液相色谱仪）当色谱峰出现异常情况时，有可能是此部件被污染，拆下用异丙醇超洗或更换过滤垫片。6、吸滤头：特殊情况下可拆下滤头抽取以判断其中是否堵塞；亦可用注射器吸取流动相通过吸滤头打出以判断其是否堵塞。若有堵塞情况可用异丙醇超声波清洗；清洗不成功则需要更换。7、流动相的抽作要求：高效液相级色谱醇，二次蒸馏水，缓冲盐一定要过滤...
几乎所有液相色谱仪接头故障都是可以避免的，按下列要求可以有效地预防接头的故障。1、使用液相色谱仪仪器设计时的部件不同厂家连接管伸出刃环的长度不完全相同，混用容易导致漏液、螺纹损坏、色谱柱进出口及检测器进液口螺母破坏等，连接管在螺母中没有良好密封也会导致漏液、死体积增加等。建议最好不要互换使用不同厂家生产的接头和刃环。2、按要求组装和拧紧接头，不可拧得过紧低压接头的故障主要有接头松动、管头损坏、螺纹“滑丝”、拧过头。低压接头用手上紧，加上锁紧螺丝可减少以上故障的发生，一旦发现低压接头损坏，应重新换新的。高压接头的故障与低压接头差不多，污染和装置不当也常有发生。3、使用合适的工具在拧紧接头的时候一定要仔细，过紧可能会损坏螺纹、刃环等，引起漏液，最糟糕的是会使接头断在螺母内部。使用手拧紧接头，不需要任何工具就可以密封。旋紧接头时最好要用死扳手，不用活扳手，保证不损坏接头。4、接头的清洁组装与拆卸接头时要检查在密封面上有无微粒和无机盐晶体。这些污染物影...
溶剂与酒不同，它随着时间的推移会降解。近年来，新分析技术的出现及低检测波长和检测限使得溶剂稳定性问题变得突出。它包括三个方面：（1）降解产物会影响分析；（2）溶剂中加入的稳定剂会影响分析；（3）若溶剂降解产物具有高度活性或毒性，安全则成为一个应考虑的因素。厂家在许多溶剂中加入稳定剂以防其降解，使用者可在含稳定剂、不含稳定剂、一种溶剂含不同稳定剂间作出选择。一些溶剂不需要稳定剂，另一些在特定应用时没有合适的稳定剂，本文讨论了几种常用的、易降解的并可加稳定剂防降解的溶剂。1、氯代烷含氯溶剂如氯仿和二氯甲烷被广泛应用于气相色谱和正相液相色谱中。降解的容易性和速度依赖于溶剂的类型和贮存条件。厂家在其中加入稳定剂以提高溶剂稳定性并适于常规应用。含氯溶剂易于发生下列自由基反应：光、热、氧气可引发自由基反应产生降解产物如光气、氯化氢和低聚物，但可向溶剂中加入稳定剂阻碍此分解过程，如醇和烯烃是现今很有效的和使用特别广泛的稳定剂。烯烃充当自由基捕获剂并能去除降解产物（如氯化氢）。较高浓度（1％）的醇可阻止氯...
